Estudio y mejora de la secreción de proteinas recombinantes en "Escherichia coli"

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de lectura: 13-06-1995Se han suplementado cepas de Escherichia coli con copias adicionales de los principales genes que regulan la secreción de proteínas a periplasma en este microorganismo. Como resultado de estas manipulaciones se ha mejorado la producción periplásmica de dos proteínas recombinantes de interés farmacológico: -La mejora de la secreción de interleukina-6 humana se consiguió incidiendo en el paso de la traslocación de la proteína a través de la membrana citoplásmica, con ayuda de los genes prlA y secE. -La mejora de la secreción del factor estimulador de colonias granulocíticas humano se logró aumentando la solubilidad de su precursor citoplásmico, con ayuda de los genes dnaK y dnaJ. Ninguna de las combinaciones de genes auxiliares ensayadas ha mostrado capacidad para mejorar de modo general la producción penplásmica de diferentes proteínas recombinantes. No parece existir una única etapa en la ruta de secreción que sea susceptible de convertirse en limitante cuando se sobreproducen diferentes proteínas de secreción heterólogas. No obstante, los trabajos realizados han rendido un valioso panel de plásmidos auxiliares con los que en el futuro se podrá probar, caso por caso, la posible mejora de la producción de nuevas proteínas recornbinantes